寝息是人命行径中不行清寒的一种生理风物，精采的寝息成心于滋长发育、机体规复以及保合手心情健 康等。但跟着当代东谈主生存边幅的变迁，尤其是新冠疫 情激勉的后续心情问题，导致失眠症的发病率逐年增 高。中国寝息扣问会公布的中国成东谈主失眠患病率已 经达到 57% 。遥远失眠不仅会导致生存质料下跌， 还会形成能量代谢零乱，加多痴肥、糖尿病及代谢综 合征等疾病的风险。

相较于以核心神经系统舒适催眠为主的化学药 物万古刻使用会出现药物依赖、呼吸扼制、挫伤知道 和精神系统等反作用，中医药在失眠防治界限中闪现 出特有上风。经典古方安寐丹，出自清代陈士铎《石 室秘录》一书。书云：“心经之病，怔忡、不寐等症，乃 心血少矣……”方中东谈主参益心气，丹参、当归补心血， 麦冬养心阴，菖蒲沸腾窍，茯神、枣仁、甘草补心神，五 味子敛心气，诸药合用，共奏益气养快慰神之功效。 临床用于协调虚证失眠并随症加减能收到精采执法 。

实际模范

将各组斑马鱼置于斑马鱼步履分析系统中，凭证 成鱼游动速度成就参数范围为：静止（-1 ，黑 色）、小领略（5-25 mm·s -1 ，绿色）、大领略（>25 mm·s -1 ， 红色），监测24 h内斑马鱼不同情状领略计数、领略时 间和领略距离。仪器将自动跟踪斑马鱼的步履轨迹， 检测好意思满后自动产生数据纪录与步履轨迹图。

伸开剩余80%

实际测试包括 3个阶段：第 1个阶段是相宜阶段。 将扫数斑马鱼王人放入 T 迷宫中解放游动，以相宜新环 境，为期 2 天。第 2 阶段是进修实际。将每组斑马鱼 鉴识放在T迷宫的肇始区域，待鱼相宜褂讪30 s后，轻 轻抽出隔板，纪录斑马鱼在T迷宫中探索6 min的行动 轨迹，鉴识纪录第 1 次干预 EC 区的时刻以及在 EC 区 停留的总时刻，未干预者记为 0 min，进步 6 min 记为 6 min。测试时刻内莫得干预EC区的将被东谈主为带领到 EC 区，并让它在其中停留 1 min。进修测试畅通 4 天 每天 1 次。第 3 阶段是安妥实际。在终末 1 次进修实 验的第 2 天进行挂念才能安妥实际，但不以食品当作 奖励，以评估学习挂念情况。结合斑马鱼步履分析系 统纪录并分析每尾斑马鱼的步履轨迹。

取斑马鱼脑组织，使用 TRIzol 提真金不怕火总 RNA 溶于 15 µL ddH2O 并进行逆转录，尔后使用 Real time-PCR 响应，以 rpl13a 为内参测定时钟基因 clocka、bmal1、 cry1a、per1a 和 per2 的相对量。执法采纳 2-ΔΔCT 法暗示 各 mRNA 抒发。引物算计打算均由武汉赛维尔生物时候 有限公司代合成，引物序列见表1.

执法闪现，与空缺组比拟，SD 斑马鱼静止情状总 计数、合手续时长、障翳距离减少，大领略情状共计数、 合手续时长、障翳距离加多，24 h日夜节奏变化幅度特征 收敛，但未见统计学互异。与模子组比拟，药物干扰 能规复模子日夜节奏特征，其中褪黑素、安寐丹高剂 量可加多静止情状计数（P<0.05）、减少大领略情状计 数（P<0.05），安寐丹低剂量加多静止情状计数（P< 0.05）（图1，表2）。

尼氏染色是不雅察神经细胞编削的一种检测模范， 染色执法闪现，空缺组斑马鱼中脑组织神经细胞数量平时，视盖区细胞结合散布在中央灰质层，尼氏小体多见，着色权臣，核相对齐备。与空缺组比较，模子组 中脑神经细胞数量清醒减少，细胞周围裂隙增宽，尼 氏小体清醒减少，着色浅。经安寐丹干扰后，SD 斑马 鱼神经元胞体较为足够，丢失情况清醒好转，尼氏小 体部分可见，着色加深，且高剂量执法优于低剂量组。褪黑素组雷同可见中脑神经元数量加多，挫伤减 轻（图2）。

图2

安寐丹是中医协调失眠症的代表方，针对上述SD 导致的步履学、细胞形式学及分子生物学编削执法， 咱们发现与模子组比拟，安寐丹能规复模子日夜节奏 特征，加多静止情状计数（P<0.05）、减少大领略情状 计数（P<0.05）；收敛第 1次干预 EC区的时刻，加多 EC 区的停留时刻；保护伞经元胞体结构，加多尼氏小体数 目；收敛生物钟基因 clocka、bmal1（P<0.01）、cry1a（P< 0.01）、per1a、per2 mRNA 相对抒发量；升高 Na+ -K+ - ATP 酶（P<0.05）、Ca2+ -Mg2+ -ATP 酶（P<0.01）及总 ATP 酶（P<0.05）活力，而且执法呈现出剂量关联性。教导 安寐丹对生物钟基因尽头抒发导致日夜节奏零乱，影 响能量代谢稳态，形成神经元挫伤这照旧由有权臣的拮抗作用。

论断：

说七说八，安寐丹不错规复斑马鱼寝息掠夺模子 日夜节奏，增强学习挂念才能，保护伞经元结构，其机 制可能与干扰 bmal1、cry1a 等生物钟基因，擢升 Na+ -K+ -ATP酶、Ca2+ -Mg2+ -ATP酶、总ATP酶等能量代谢酶 活性关联。但本实际并未对生物钟干扰能量代谢的 关节路线进行深一步的接洽，后期将不绝开展日夜节 律与能量代谢的关联性分析和机制扣问。

参考文件：

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［2］徐波, 刘保延, 王平. 基于果真天下挖掘王平辨治失眠教授. 中国中 医基础医学杂志, 2020, 26(7):944-946.

［3］谢光璟, 徐波, 黄攀攀, 等 . 安寐丹通过成就线粒体分裂/和会失衡 情状改善寝息掠夺模子大鼠学习挂念水平. 天下科学时候-中医药 当代化, 2021, 23(9):2986-2993.

［4］徐波, 夏婧, 蔡铭, 等. 安寐丹对不同周期寝息掠夺模子大鼠日夜节 律、学习挂念及食欲素的影响. 中华中医药杂志, 2021, 36(3):1677- 1682.

［5］安寐丹干扰斑马鱼寝息掠夺模子日夜节奏及 能量代谢作用机制扣问＊ 汪 卿，游秋云九游会体育，丁 莉，夏 婧＊＊，王 平

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